HE染色中,常常出现意想不到的问题。最常见的问题之一就是组织会从载玻片上脱落。这不仅造成材料的浪费,还造成前期取材,固定,切片,等大量工时的浪费。为此,贝安特结合多位专家的实践经验,将脱落原因整理如下,供诸位参考。
1. 切片过厚
建议:我们可将切片做到厚薄均匀,厚度掌握在3-5um之间。
2. 烤片温度低、时间短
建议:我们可以调整烤片温度和时间,20-30min即可。
3. 烤片温度过高、时间过久
导致组织切面烤焦、收缩变形出现皱褶也易脱落。
建议:我们可以调整烤片的温度和时间。
4. 组织本身原因
如凝血块、血栓、干涸或过硬的组织及碎组织等,切片染片时易脱落。
建议:我们可以用防脱载玻片来解决。
5. 组织脱水、透明不足
石蜡不能浸入,组织发软,切片脱蜡时收缩,遇水又膨胀而脱落。
建议:我们可以调整组织固定、脱水、透明浸蜡的时间。
6. 组织脱水,透明过度
浸蜡时间过久或温度过高,造成组织急剧收缩,过硬、过脆导致切片不完整也易脱落。
建议:我们可用乙醇和甘油各半浸泡切面后再切片。
7. 展片水温过低
切片有皱褶没摊平或捞片时组织面有气泡
建议:我们可调整水温、捞片时排空气泡。
8. 载玻片清洗不干净
切片表面有油渍或灰尘。
建议:我们可换洁净载玻片。
9.脱片
脱蜡后未经由高至低浓度乙醇冲入水,冲水过猛或晃动过甚,也 易使切片脱落。
建议:我们需要安装染液技术操作规程要求操作。
10. 染色液或试剂的酸碱度不适宜
分化液或反蓝液过浓,也可导致切片脱落。
建议:我们可换用标准化、商品化的染色液和试剂。
11. 染色失当或染色效果不佳
退回重新染色易引起切片脱落。
建议:最初染色时,我们可按照染色技术操作规程要求操作。
12. 染色液或染色器皿不洁净
建议:操作前,我们可以过滤染色液并清洗器皿。
综上,HE染色组织切片脱落的原因是多方面的,其中有非染色技术问题,有的是染色前取材、固定、脱水、透明、切片等处理不当所致。那么怎么才能有更大的几率能够做出成功的HE染色切片呢?小编请你尝试下贝安特HE高清恒定染色液。
HE高清恒定染色液是一款能够帮助您实现HE染色标准化的产品,它由稳定液、苏木素染液、伊红染液、反蓝液、分化液组成,不含氯化汞、甲酸等有毒有害试剂,染色效果清晰透亮,核质分明,染片色彩稳定耐久,可保证第一片到底5000片染色效果一致。
染色效果展示