(2)染色液及所用试剂酸碱度不适宜是一个很常见的重要原因。在 HE 染色时，用碱性过大的溶液返蓝，容易引起胞质褪色，如果用 pH弱碱性溶液返蓝并经自来水冲洗，就不易引起切片褪色。
(3)配制伊红染液时如果加促染剂冰醋酸过多,会产生大量泡沫浮在液面上,较长时间不易消失,染液容易混浊,使用时间不长就产生沉淀,上清液呈浅淡粉颜色,说明染液失效即使染上颜色也易褪掉。
流水返蓝的效果比使用碱性液体返蓝液效果好，核/浆对比度高，保存长时间少褪色甚至不褪色。或者使用商用专业染液，如贝安特HE高清恒定染色液，返蓝效果好，染色效果恒定及稳定。
分化时间及浓度需把控，分化溶液会把过染色的细胞核及不应染色的细胞质成分脱色。
分化后应充分流水冲洗，避免切片残留酸性物质，造成切片长时间处于酸性弱分化环境。
伊红属酸性混合溶液，伊红染色后也应尽量把酸性环境去除
封片不严，组织切面内混有大量水分或小气泡
封片胶过稀，封片胶干后易造成组织暴露
封片胶PH值不适宜，应选用中性树胶封片
封片前脱水不干净，酒精暴露空气中时间过长吸水
光照下HE片子长时间暴露
尽可能避免高温、高湿度环境保存
使用专业病理切片存放柜
有条件可以独立放置档案室
HE切片褪色会造成很多不方便，但如您使用贝安特HE高清恒定染色液，并通过专业试剂工程师提供的染色方案，避免上述做法，即可实现染色效果稳定恒定，使用中性树胶封片长期不褪色。一升HE套装可恒定染色1-5000片。